Kane n'a plus joué depuis sa blessure au ligament d'une cheville subie en quarts de finale aller de la Ligue des champions contre Manchester City le 9 avril.
Le buteur a néanmoins déclaré la semaine dernière qu'il espérait être rétabli à temps pour jouer la finale de la Ligue des champions contre Liverpool le 1er juin à Madrid.
"Il est en train de travailler afin d'être disponible pour eux (Tottenham, ndlr) pour cette finale", a déclaré Southgate à l'annonce de son groupe.
"C'est le capitaine de notre équipe, le nombre de buts qu'il a marqués pour nous (l'Angleterre) est phénoménal. Nous lui laissons la porte ouverte et nous verrons comment les choses vont évoluer", a ajouté le sélectionneur.
En Ligue des Nations, les Trois Lions doivent rencontrer les Pays-Bas en demi-finale, le 6 juin à Guimaraes au Portugal.
Un nouveau venu apparaît dans le groupe de l'Angleterre: Nathan Redmond, le milieu de terrain de Southampton.
Liste des 27 joueurs retenus en vue du Final Four de la Ligue des Nations:
. Gardiens: Jack Butland (Stoke City), Jordan Pickford (Everton), Tom Heaton (Burnley)
. Défenseurs: Trent Alexander-Arnold, Joe Gomez (Liverpool), Ben Chilwell, Harry Maguire (Leicester City), Michael Keane (Everton), John Stones, Kyle Walker (Manchester City), Danny Rose, Kieran Trippier (Tottenham Hotspur)
. Milieux de terrain: Dele Alli, Eric Dier, Harry Winks (Tottenham Hotspur), Jordan Henderson (Liverpool), Ross Barkley (Chelsea), Declan Rice (West Ham), Fabian Delph (Manchester City), Jesse Lingard (Manchester United), James Ward-Prowse, Nathan Redmond (Southampton)
. Attaquants: Marcus Rashford (Manchester United), Jadon Sancho (Borussia Dortmund/GER), Harry Kane (Tottenham Hotspur), Callum Wilson (Bournemouth), Raheem Sterling (Manchester City)